Chemiluminiscenčná imunoanalýza, CLIA je vysoko citlivá imunoanalýza.
1. Princíp
Chemiluminiscenčný imunotest kombinuje špecifickosť imunitnej odpovede a vysokú citlivosť chemiluminiscencie. Jeho základným princípom je spojenie špecifickej imunitnej odpovede medzi antigénom a protilátkou s chemiluminiscenčnou reakciou. Konkrétne sa antigén v testovanej vzorke spája so špecifickou protilátkou za vzniku imunitného komplexu. Potom prostredníctvom série chemických reakcií imunitný komplex vytvára chemiluminiscenčný signál. Intenzita luminiscencie je úmerná koncentrácii antigénu, ktorý sa má testovať, a obsah antigénu, ktorý sa má testovať, možno kvantitatívne analyzovať detekciou intenzity luminiscencie.
2. Hlavné komponenty
Protilátky: vrátane zachytávacích protilátok a detekčných protilátok. Záchytná protilátka je zvyčajne fixovaná na nosiči na pevnej fáze, aby zachytila antigén, ktorý sa má testovať. Detekčná protilátka je kombinovaná s chemiluminiscenčným markerom na detekciu antigénu v imunitnom komplexe.
Nosič tuhej fázy: ako sú mikrodoštičky, magnetické guľôčky atď., ktoré sa používajú na fixáciu záchytnej protilátky na uľahčenie imunitnej reakcie a separácie a premývania.
Chemiluminiscenčný marker: zvyčajne látka, ktorá môže produkovať luminiscenčný signál v chemickej reakcii, ako je luminol, akridíniumester atď. Marker sa kombinuje s detekčnou protilátkou a vytvára chemiluminiscenčný signál po imunitnej reakcii.
Detekčný systém: vrátane zariadení, ako sú luminiscenčné detektory, ktoré sa používajú na detekciu intenzity chemiluminiscenčných signálov a ich premenu na čitateľné hodnoty.
3. Vlastnosti
Vysoká citlivosť: Dokáže detekovať extrémne nízke koncentrácie testovanej látky, ktorá je zvyčajne o niekoľko rádov citlivejšia ako tradičné metódy imunoanalýzy.
Široký lineárny rozsah: Obsah testovanej látky možno presne merať v širokom rozsahu koncentrácií bez viacnásobného riedenia.
Silná špecifickosť: Na základe špecifickej väzby antigénu a protilátky je vysoko selektívny pre špecifické testované látky.
Rýchly: Detekčný proces je relatívne rýchly a výsledky možno vo všeobecnosti získať za kratší čas.
Vysoký stupeň automatizácie: Je vhodný na detekciu veľkých vzoriek a možno ho použiť v spojení s automatizovanými prístrojmi na zlepšenie účinnosti detekcie.
4. Oblasti použitia
Klinická diagnostika: Používa sa na detekciu rôznych biomarkerov, ako sú nádorové markery, hormóny, markery infekčných ochorení atď., čím sa poskytuje dôležitý základ pre diagnostiku ochorenia, monitorovanie liečby a hodnotenie prognózy.
Vývoj liekov: Používa sa na monitorovanie koncentrácie liekov, hodnotenie účinnosti a výskum metabolizmu liekov.
Testovanie bezpečnosti potravín: Detekcia škodlivých látok, rezíduí pesticídov, zvyškov veterinárnych liečiv a pod. v potravinách.
Environmentálny monitoring: Detekcia škodlivín a toxických látok v životnom prostredí.